凍存管又稱菌種保存管、磁珠保存管、磁珠凍存管。微生物實驗室常用的菌種保存方法有牛奶法、甘油法、斜面法等。復雜程度各異,效果也差別很大。目前國內(nèi)的大多數(shù)實驗室都是實驗人員自行制作菌種保存管,這不僅增大了工作強度,并且由于各種條件的限制,菌種保存效果不能總是令人滿意。所以,這就需要掌握好凍存管的使用方法和一些注意事項,這樣才能起到很大的作用。
一、使用方法
1、使用凍存管儲存樣本時,嚴格要求應把凍存管放入液氮的氣相層或冰箱中保存。如果凍存管儲存于液氮液體中,液氮有一定幾率會滲入凍存管內(nèi)部,復蘇時液氮氣化導致管內(nèi)外壓力不平衡,這樣極易造成凍存管的炸裂,并具有生物危害性。
2、操作凍存管復蘇,全程使用安全防護設(shè)備,建議穿實驗服、戴棉質(zhì)手套且在安全的實驗臺上進行操作。條件允許情況下,請佩戴護目鏡或防護面罩。由于夏季室內(nèi)溫度會高于冬季,請格外小心。
3、凍存細胞儲存過程中,凍存管的冷凍溫度須均勻。不均勻的受凍將會導致冰塞的產(chǎn)生,冰塞會抑制兩側(cè)的液體溫度傳遞進而產(chǎn)生危險的高壓力并導致凍存管受損。
4、凍存的樣本量不要超過凍存管要求的最大工作體積。
二、注意事項
1、凍存管保存環(huán)境
未經(jīng)使用的凍存管可在室溫或2-8℃保存12個月;已經(jīng)接種的凍存管在-20℃保存,12個月內(nèi)可有良好的菌株保存效果;已經(jīng)接種的凍存管在-80℃保存,24個月內(nèi)可有良好的菌株保存效果。
2、凍存管保存時間
未經(jīng)使用的凍存管可在室溫或2-8℃保存;已經(jīng)接種的凍存管在-20℃或-80℃保存。
3、凍存管的使用步驟
從細菌純培養(yǎng)物中挑取新鮮培養(yǎng)物配成大約為3-4麥氏比濁度的菌懸液接種與菌種保存管中;擰緊保存管,來回顛倒4-5次使細菌乳化,不能旋搖;把保存管放入冰箱保存(-20℃--70℃)。
三、重要提醒
1、需在生物安全柜中操作,確保操作的無菌,確保菌株不被污染。
2、凍存管中小瓷珠的顏色可能有所不同,這不代表任何產(chǎn)品功能的不同,只是方便用戶進行細菌編碼、標記。
3、在接種之前有如下情況產(chǎn)生,該凍存管不得使用:
a. 瓶子有漏液情況發(fā)生。
b. 凍存管內(nèi)的凍存保護液混濁(說明已經(jīng)被污染)。
c. 超過有效保存期。
4、小瓷珠一旦從凍存管中取出,不得以任何原因再放回凍存管中。
5、當丟棄使用過的或部分使用過的凍存管時,應注意生物危害的預防。